Gel-filtration chromatography adalah metode pemisahan protein berdasarkan perbedaan ukuran dan konformasinya dengan cara melewatkan protein terse but pada suatu kolom yang mengandung bead-bead matrix sebagai media pemisah. Di bawah ini ditampilkan data kromatogram enam protein globuler yang dipisahkan menggunakan metode filtrasi gel. Protein Berat molekul (kDa) Volume elusi (mL) Ribonuclease A 13 250 Chymotrypsinogen 25 228 Ovalbumin 43 199 Boovine Serum Albumin 67 176 Aldolase 158 146 Catalase 232 123 Tentukan apakah pernyataan berikut benar atau salah. Sebelum dimasukkan ke dalam kolom filtrasi gel, protein diberi perlakuan khusus agar mengalami linearisasi dan memiliki rasio massa muatan yang sama (sebagaimana yang dilakukan pada SDS PAGE).

Pembahasan

Sodium dodecyl sulfate polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE) merupakan metode yang digunakan untuk mengetahui berat molekul dari suatu protein. Prinsip kerja dari SDS-PAGE adalah ketika protein dipisahkan oleh elektroforesis melalui matriks gel dan arus listrik diberikan, protein dengan molekul yang lebih kecil bermigrasi lebih cepat sedangkan molekul yang lebih besar akan tertahan akibat pergerakan yang lebih lambat. Biasanya sampel protein langsung dimasukkan ke dalam gel yang telah dibuat melalui ujung atas stacking gel sebanyak yang diperlukan. Sedangkan Size exclusion chromatography, atau yang dikenal juga dengan gel permeation atau filtration chromatography biasa digunakan untuk memisahkan dan memurnikan protein. Metode ini tidak melibatkan berbagai macam penyerapan dan sangat cepat. Biasanya protein akan diberikan perlakuan khusus yaitu dilarutkan terlebih dahulu dengan pelarut tertentu. Molekul-molekul yang kecil akan memasuki pori-pori dari gel sedangkan molekul besar akan melewati sela-sela gel lebih cepat bila dibandingkan dengan molekul yang melewati pori-porinya. Dengan demikian, pernyataan di atas SALAH.